如何用ELISA試劑盒檢測硫磷殘留

通過制備對硫磷的特異性抗體，建立了蔬菜中對硫磷殘留的酶聯(lián)免疫吸附分析法（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）。先將對硫磷苯環(huán)上的硝基還原為氨基，然后采用重氮化法將氨基-對硫磷與牛血清白蛋白（BSA）或卵清白蛋白（OVA）相偶聯(lián)，分別合成了免疫原和包被抗原：氨基對硫磷-BSA、氨基對硫磷-OVA。對合成的抗原進(jìn)行紫外可見掃描，確證偶聯(lián)成功。用免疫原免疫新西蘭大耳白兔，制得對硫磷抗血清，測得其效價為1：2000，用飽和硫酸銨沉淀法得到純化抗體，與其它類似物的交叉反應(yīng)為甲基對硫磷：1.22％，毒死蜱：0.09％，殺螟松：0.06％，標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍為5-1000ng／mL。用此血清建立的ELISA方法檢測蔬菜樣品（小白菜、豆角、辣椒）中添加的對硫磷標(biāo)準(zhǔn)樣品，平均回收率為96.52％，與GC方法的相關(guān)性很高，準(zhǔn)確性大大高于酶抑制法，整個測定大約在（不包括包被時間）1.5h內(nèi)完成。