λ噬菌體基因組DNA提取試劑盒如何正確使用

λ噬菌體基因組DNA提取試劑盒如何正確使用

上海信帆生物公司的λ噬菌體基因組DNA提取試劑盒，操作簡單，價格實惠，資料穩定。是簡便的λ噬菌體基因組DNA的試劑盒，其提取原理是通過PEG沉淀、酚異戊醇等提取，殘留碎片通過沉淀離心去除，通過一系列快速的漂洗、離心步驟，將鹽、細胞代謝物、蛋白等雜質去除。

獲得λ噬菌體基因組DNA，可進行酶切、PCR等下游實驗，獲得DNA的量很高，但是純度一般，但是足夠用于大多數分子生物學實驗。

噬菌體載體廣泛用于文庫篩選，目的克隆培養獲得大量的噬菌體顆粒需要提取λ噬菌體DNA來開展測序等后續工作。λ噬菌體裂解培養物離心后的上清，首先用RNaseA/DNaseⅠ混合酶消化去除殘留的宿主菌DNA/RNA,沉淀收集噬菌體。

λ噬菌體基因組DNA提取試劑盒如何正確使用

1、用于裂解的噬菌體、宿主菌越新鮮，裂解越好、收獲量越大。

2、液體培養裂解時，到了時間裂解還沒發生，可適當的提高溫度或加大振搖速度。

3、RNase/DNase消化過度，可能減少產量；消化不*，可粘走部分噬菌體。

4、噬菌體裂解液在低溫下易結晶析出白色物質，可37℃溫浴至*溶解。

λ噬菌體是長尾噬菌體科的一種溫和噬菌體。λ噬菌體是雙鏈DNA噬菌體，有直徑55nm的二十面體頭部，末端有細長尾絲的非收縮尾。DNA是線性分子，有黏性末端即單鏈延伸12個核苷酸，故感染后線性基因組可立即環化。

λ DNA有一個噬菌體結合位點，可與細菌結合位點形成堿基配對，細菌結合位點位于大腸桿菌染色體上半乳糖或gal操縱子和生物素操縱子之間。兩個位點配對后，整合酶在一種特異宿主蛋白的輔助下催化病毒和細菌DNA鏈和物理交換，環狀λ DNA以線性整合進大腸桿菌DNA上毗鄰gal操縱子的位置，稱之為前噬菌體。

λ噬菌體基因組DNA提取試劑盒如何正確使用